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冷凍干燥機對細胞的活性有什么影響?
冷凍干燥器又稱冷凍干燥機。冷凍干燥器就是將含水物質(zhì),先凍結(jié)成固態(tài),而后使其中的水分從固態(tài)升華成氣態(tài),以除去水分而保存物質(zhì)的冷干設備。
實驗用凍干機是一種用于實驗室內(nèi)少量樣品冷凍干燥的小型凍干機,包括殼體、制冷機組、真空泵、冷阱,電控系統(tǒng)。其制冷機組設置在殼體內(nèi);冷阱設在殼體上部;真空泵通過真空管道連通冷阱。
制冷機組具有壓縮機、換熱器、膨脹閥、蒸發(fā)器;還包括物料放置裝置,物料放置裝置安裝在冷阱上方及殼體上,且與冷阱上端連通;蒸發(fā)器為蒸發(fā)盤管,其設置在冷阱內(nèi)。將蒸發(fā)器改設成蒸發(fā)盤管,且設置在冷阱內(nèi),降溫速度快。
實驗用凍干機在真空狀態(tài)下,從固態(tài)的樣品中直接將溶劑升華為氣態(tài)而達到干燥的目的。由于是在常溫甚至低溫狀態(tài)下干燥樣品,所以不影響其樣品的生物活性,并且處理后的樣品呈酥松多孔狀態(tài),易于溶解。所以凍干是保存生物活性樣品的好方法。
物料的預凍是冷凍干燥過程的關(guān)鍵步驟,預凍過程的好壞直接影響冷凍干燥產(chǎn)品的品質(zhì)。物料預凍過程基本可分為慢速冷凍、快速冷凍,用戶可根據(jù)具體需要靈活操作設備,達到物料的有效預凍。
凍干機在干燥過程中,干燥對細胞存活率的影響主要集中在干燥的第二階段。凍干樣品中殘存5%左右的水分對于維持細胞結(jié)構(gòu)和胞內(nèi)大分子穩(wěn)定性是必要的。
凍干機在干燥時樣品表面失水較快,容易使樣品局部過干,破壞了生物大分子物質(zhì)的水分子保護層,這不僅會損害細胞生物活性物質(zhì)的活性,而且還會導致脂類或蛋白質(zhì)的氧化反應,產(chǎn)生自由基,影響細胞活性。
凍干實驗中發(fā)現(xiàn),保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌的冷凍和干燥的存活率分別為70.4%和89.7%,說明冷凍干燥過程中,冷凍是造成損傷的主要原因,干燥過程造成的損傷較小。影響微生物凍干效果的因素有很多,有微生物生理狀態(tài)、細胞大小、細胞濃度、pH值、冷凍保護劑、預凍溫度、降溫速率、冷凍干燥條件、細胞含水量等。